3ª PRÁCTICA: RECONOCIMIENTO DE GLÚCIDOS

 3.1. ESTUDIO DE AZÚCARES REDUCTORES

OBJETIVO:

Los azúcares son un grupo de glúcidos que cumplen una serie de características como: proporcionan el sabor dulce a los alimentos, actúan como conservantes para mantener la frescura y calidad de ciertos alimentos, proporcionan fermentación, etc. 

Dentro de ellos encontramos los monosacáridos, los disacáridos y los polisacáridos (dependiendo de las unidades de monosacáridos de las que estén formados). Concretamente, la mayoría de monósacaridos y disacáridos poseen un poder reductor. Esto quiere decir que pueden donar electrones o recibir protones cuando se encuentran en una reacción de reducción-oxidación, donde uno o más electrones se transfieren entre los reactivos y provocan un cambio en su oxidación.

Vamos a hacerlos reaccionar con unos reactivos que contienen sulfato de cobre (II), de color azul, y si la reacción cambia a color rojo significará que ese glúcido es reductor.

MATERIALES:

-Materiales del laboratorio:

• Espátula
• Matraces aforados de 100 ml
• Pipetas 
• Rellenapipetas
• Tubos de ensayo
• Gradilla
• Pinzas de madera
• Mechero
• Báscula
• Papel secante
• Marcador de vidrio

-Materiales biológicos:

• Monosacáridos: glucosa, fructosa
• Disacáridos: maltosa, lactosa, sacarosa
• Polisacáridos: almidón
• Agua del grifo

-Reactivos:

• Solución de Fehling A
• Solución de Fehling B

PROCEDIMIENTO:

1. Primeramente, preparamos las 6 disoluciones al 5%. Para ello, medimos 5 gramos de cada azúcar con ayuda de una báscula. Los echamos en unos matraces aforados (de forma separada) y completamos hasta el aforo de 100 ml con agua. Removemos con una espátula hasta diluirlo.
   
   
   
2. Colocamos una gradilla con los 7 tubos de ensayo y en cada uno echamos 3 ml de cada disolución por separado con la ayuda de la pipeta. Uno de ellos llevará únicamente agua ya que lo utilizaremos para hacer un experimento prueba y ver qué es lo que ocurre.
3. A continuación, echaremos a cada tubo de ensayo 1 ml de solución Fehling A, que contiene CuSO4, y Fehling B (que ayuda a que de lugar la reacción neutralizando el medio)
4. Sólo quedaría calentar uno a uno los tubos de ensayo dándoles pequeños golpes de calor y ver los resultados.

RESULTADOS:

Glúcido	Glucosa(2)	Almidón(3)	Lactosa(5)	Fructosa(1)	Sacarosa(4)
Reductor	positivo	negativo	negativo	positivo	negativo

El número 6 es la maltosa y el resultado es positivo

EL tubo de ensayo que contenía el agua dio resultado negativo.

CONCLUSIONES:

Hemos obtenido que la glucosa, fructosa, sacarosa y maltosa tienen poder reductor, mientras que el agua, almidón y la lactosa no lo tienen, o lo que es lo mismo, no tienen carbonos anoméricos libres.

Como curiosidad, en nuestro organismo existen unas moléculas que también tienen poder reductor y que nos ayudan a conseguir ATP para poder obtener energía.

3.2. HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA

OBJETIVO:

En la práctica anterior hemos comprobado que la sacarosa no tiene poder reductor porque no posee carbonos anoméricos libres y en la reacción de Fehling nos dio un resultado negativo. Pero vamos a ver qué ocurre cuando la calentamos en presencia de HCl.

Podemos obtener dos resultados: si  no hay un cambio de color el resultado será negativo y será debido a que el proceso no se ha realizado correctamente. Por el contrario, si cambia a un color rojo, el resultado será positivo.

MATERIALES:

-Materiales del laboratorio:

• Pipeta
• Rellenapipetas
• Espátula
• Marcador de vidrio
• Cuentagotas
• Mechero
• Papel secante
• Pinzas de madera
• Tubos de ensayo
• Gradilla
• Matraz aforado

-Materiales biológicos:

• Disolución de sacarosa

-Reactivos:

• Solución de Fehling A
• Solución de Fehling B
• HCl diluido 10%
• Bicarbonato de sodio diluido 10%

PROCEDIMIENTO:

1. En un tubo de ensayo echamos 3 ml de la disolución de sacarosa y con el cuentagotas, 10 gotas de HCl diluido al 10%. Para preparar la disolución del ácido clorhídrico echamos en un matraz aforado 10 ml de HCl y completamos con agua hasta completar los 100 ml.
2. Calentamos el tubo durante 5 minutos aproximadamente dándole pequeños golpes de calor.
3. Pasado el tiempo esperamos a que se enfríe y agregamos 3 ml de NaHCO3.
4. Repetiremos la prueba de Fehling que hemos realizado en la práctica 3.1.
5. Observamos los resultados.

RESULTADOS:

La disolución de la sacarosa ha sufrido un cambio en la coloración después de este proceso, por lo que el resultado es positivo

CONCLUSIÓN:

Hemos comprobado que la sacarosa en presencia de HCl padece un proceso de hidrolización, es decir, incorpora una molécula de agua y forma los monosacáridos glucosa y fructosa, que como comprobamos en la anterior práctica, sí son reductores.

Este experimento también lo realizamos únicamente dándole calor al tubo, pero nos dimos cuenta de que era necesario agregar el HCl para que se puediera dar el proceso dicho.

3.3. INVESTIGACIÓN DE POLISACÁRIDOS (ALMIDÓN)

OBJETIVO:

Como comprobamos en la práctica 3.1., el almidón no tiene poder reductor ya que la reacción de Fehling dio resultado negativo. Además, este polisacárido está formado por: la amilosa (que cambia a color azul cuando se sitúa junto al yodo por una fijación de éste elemento en la superficie de la molécula de amilosa) y la amilopectina. Lo vamos a hacer reaccionar con un reactivo conocido como Lugol que tiene yodo y yoduro potásico.

MATERIALES:

-Materiales del laboratorio:

• Tubos de ensayo
• Gradilla
• Pipeta
• Rellena pipetas
• Cuentagotas
• Mechero
• Pinzas de madera
• Vaso de precipitados
• Placa petri

-Materiales biológicos:

• Disolución de almidón
• Trozo de pan
• Agua del grifo

-Reactivos:

• Solución de lugol
• Solución de Fehling A
• Solución de Fehling B

PROCEDIMIENTO:

1. En un tubo de ensayo echamos 3 ml de la disolución de almidón y con el cuentagotas, 3 gotas de lugol.
2. Calentamos el tubo de ensayo hasta que se decolore y quede transparente (como siempre, lo haremos dándole pequeños golpes de calor con el mechero).
3. Cuando se haya enfriado, lo metemos en un vaso de precipitados con agua y vemos cómo en 2-3 min. se vuelve otra vez de color azul.
   
   
   
4. A parte vamos a realizar un experimento control, en el que vamos a echar 3 ml de agua y 3 gotas de lugol en un tubo de ensayo. Obviamente, el resultado será negativo.

También hemos querido comprobar qué es lo que ocurre cuando hacemos romper el almidón en maltosa y si al hacer la prueba con los reactivos de Fehling nos da resultado positivo.

1. Masticaremos durante aproximadamente 5 minutos un pequeño trozo de pan (que contiene almidón) y pasado este tiempo lo echaremos en un tubo de ensayo.
2. Añadimos la misma cantidad de agua y lo decantamos.
3. Incorporamos 1 ml del reactivo de Fehling A y 1 ml de Fehling B.
4. Lo calentamos con el mechero y comprobamos los resultados.

Antes hemos visto que el pan tiene almidón. Para comprobarlo, vamos a realizar una prueba muy sencilla.

1. En una placa petri colocamos un trozo de pan al que le echaremos unas gotas de lugol. También lo podríamos hacer echándole betadine y veríamos cómo ocurre lo mismo.
2. Observamos los resultados.

RESULTADOS:

Prueba control con agua

Prueba de Fehling del pan masticado

Pan con gotas de lugol

CONCLUSIONES:

En el primer caso no obtuvimos los resultados que esperábamos porque después de enfriar el tubo de ensayo no volvió a teñirse de color azul.

La prueba control del agua nos dio negativo, pero la prueba del pan masticado con el lugol dio positivo, lo que nos indica que el almidón se rompió gracias a la amilasa de nuestra saliva (es un enzima digestivo) hasta dar maltosa que sí es un azúcar reductor.

Por último, la prueba del trozo de pan con el lugol nos indicó la presencia del proceso de fijación de yodo. Esto lo sabemos por el color morado tan intenso que apareció en la zona donde habíamos echado las gotas.